多克隆抗體特點：

1.識別任一抗原上的多個表位，所得血清為異質(zhì)性抗體混合物，親和力各有不同

2.主要有IgG亞類組成
3.通常使用多肽免疫原制備以獨有表位為靶標的多克隆抗體，尤其是針對高同源性蛋白家族

優(yōu)劣勢：

1. 高親和性：由于靶蛋白上的多個表位能夠結(jié)合不止一個抗體分子，多抗可放大低表達水平靶蛋白的信號
2.可識別多個表位，有利于免疫沉淀和染色質(zhì)免疫沉淀實驗獲得更好的結(jié)果
3.與相似抗原有更多交叉反應(yīng)，可放大低表達信號，染色背景干擾較高
4.對微小抗原變化的包容性更強，可檢測同源性的蛋白家族

單克隆抗體特點：

1. 識別一個抗原上的單一抗原表位
2.僅由一種抗體亞型組成（IgG1、IgG2、IgG3）如需使用二抗進行檢測，應(yīng)針對正確的亞類選擇抗體

優(yōu)劣勢：

1.高特異性：單抗適用于實驗中的一抗，產(chǎn)生背景染色信號通常顯著低于多克隆抗體
2.與多抗相比，同質(zhì)性較高，結(jié)果重現(xiàn)性較高
3.特異性地檢測一個靶表位，不易與其它蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)，染色背景干擾低
4.檢測單一抗原或蛋白質(zhì)家族的單一成員

用于生產(chǎn)抗體的宿主具有許多種,最常見的兩種是小鼠和兔子。小鼠通常是用于產(chǎn)生單克隆抗體的宿主,具有免疫周期較短、成本較低等優(yōu)勢。小鼠抗體可用于早期發(fā)現(xiàn)研究，體內(nèi)臨床前治療研究,體外診斷。與小鼠相比,兔子具有較高的成功率和更廣泛的抗原適應(yīng)范圍。兔子抗體可以識別更多種類的表位,與小鼠抗體相比具有更高的親和力和特異性。

減少免疫原性、保持親和力和特異性、提高臨床應(yīng)用的安全性和有效性

抗體設(shè)計涉及到多個方面，包括免疫原的設(shè)計、免疫過程的優(yōu)化、目的抗體篩選、抗體純化、應(yīng)用鑒定等。免疫原可以是天然蛋白、重組蛋白、多肽或DNA。設(shè)計免疫原時，需考慮免疫原分子的特點和抗體的應(yīng)用，以確定使用哪種類型的免疫原和免疫原的序列。

抗體發(fā)現(xiàn)的方法包括噬菌體展示技術(shù)、雜交瘤技術(shù)等。其中，噬菌體展示技術(shù)是一種將外源蛋白或多肽的編碼基因插入到噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當位置，使外源基因隨外殼蛋白的表達而表達，同時，將外源蛋白或多肽展示在噬菌體表面，進而實現(xiàn)蛋白或多肽與相應(yīng)受體結(jié)合的技術(shù)。

原理不同：

5’RACE是在低豐度轉(zhuǎn)錄本中快速擴增cDNA的5’端

多重PCR與普通PCR相同

擴增區(qū)域：

5’RACE可擴增區(qū)域為CDR1-3

多重PCR可擴增區(qū)域為CDR3

疫苗的設(shè)計與評估、腫瘤診斷、自身免疫性疾病等

雜交瘤細胞測序相較于直接對抗體進行基于蛋白質(zhì)分析的測序相比,提供更準確更可靠的結(jié)果,防止蛋白測序中如亮氨酸/異亮氨酸較難區(qū)分等潛在風險。

經(jīng)過雜交瘤測序,可以獲得相應(yīng)的序列,在后續(xù)項目中有需要用到單克隆抗體的時候,可以利用測得的基因序列進行重組抗體的制備。解決了雜交瘤保存過程中,細胞死亡或高特異性丟失的問題。

慢病毒包裝系統(tǒng)有兩種不同。第一，第二代系統(tǒng)由編碼HIV蛋白gag、pol、rev和tat的包膜質(zhì)粒和包裝質(zhì)粒組成。第三代系統(tǒng)需要一個包膜質(zhì)粒和兩個包裝質(zhì)粒，一個編碼gag和pol，另一個編碼rev；第二，第三代包裝系統(tǒng)修改了轉(zhuǎn)移質(zhì)粒的5'LTR，以消除對HIV-Tat蛋白的需要，因此被認為更安全。

第二代轉(zhuǎn)移質(zhì)粒必須用第二代系統(tǒng)包裝，因為野生型5'LTR啟動子需要Tat才能發(fā)揮作用。第三代質(zhì)粒可使用任一系統(tǒng)包裝。

1. 無包膜病毒：腺病毒是一種沒有包膜的病毒，這使得它在包裝過程中較為穩(wěn)定，易于制備出高滴度的病毒。

2. 外源基因包裝容量大：腺病毒具有較大的外源基因包裝容量，可以包裝約8kb的外源基因，這使得它成為基因治療等領(lǐng)域的重要載體。

3. 廣泛的宿主范圍：腺病毒能夠感染處于分裂或未分裂的細胞，具有廣泛的宿主范圍，包括人類和其他動物細胞。

4. 基因組穩(wěn)定：腺病毒的基因組穩(wěn)定，可在未分裂的細胞中存在數(shù)年且不與宿主發(fā)生整合，這減少了基因突變和致癌的風險。

5. 較為安全：相對于皰疹病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒等其他病毒載體，腺病毒不會導(dǎo)致嚴重的人類疾病，因此在臨床應(yīng)用中較為安全。

6. 強烈的免疫應(yīng)答：腺病毒可通過特定的整合素進入樹突狀細胞，相對于其他病毒載體和DNA載體，它能夠刺激更強的免疫應(yīng)答，這在疫苗研究和免疫治療中具有潛在優(yōu)勢。

AAV在多種細胞類型中具有較高的轉(zhuǎn)染效率，包括難以轉(zhuǎn)染的原代細胞和神經(jīng)細胞。不同的AAV血清型對不同細胞和組織的轉(zhuǎn)染效率有所不同。